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山東錦(jǐn)泰環淨液體葡萄糖檢測方法(fǎ)

瀏覽量:765 來源:山東錦泰環境 時間:2023-10-18 15:23:54

信息摘要:

發酵過程常見工業葡萄糖檢測方法,如菲林滴(dī)定法、氧化酶一偶聯比色法(GOD POD法) 、氣相色譜法 、高效液相色譜法,旋光法、生物傳感器(qì)法(fǎ)。

發酵過程常見工業葡萄糖檢測方法,如菲林滴定法(fǎ)、氧化酶一偶聯比色法(GOD POD法) 、氣相色譜法 、高效液相(xiàng)色譜法,旋光法、生物傳感器法。
菲(fēi)林滴(dī)定法
原理(lǐ):還原糖可以將菲林試劑中的(de)二價銅離子還原為一價銅離子,反應終點可以 由次甲基蘭(lán)指示(藍色消失形成磚紅色),根據一定量的菲林試劑完全還原所需的還原糖(táng)量,可計算加入樣品中的還原糖的含量。
1.試劑 菲林試劑甲液:稱取69.3g硫(liú)酸銅晶體,用蒸餾水(shuǐ)溶解,定容(róng)至1000ml 菲林試劑乙液(yè):稱取346g酒石(shí)酸鉀鈉,100g氫氧化(huà)鈉,用蒸餾水溶解定容至(zhì)1000ml 次甲基藍(lán)溶液:1g次甲基藍溶於100ml水(shuǐ)
2.儀器 水(shuǐ)浴鍋。
特點:手(shǒu)工操作,過程複雜,受到多種因(yīn)素幹擾,但(dàn)是成本較(jiào)低,所以目前仍為多數企業采用。
通過(guò)原理可以分析出本方法檢測結果其實是還(hái)原糖,而非絕對的葡萄糖量。
氧化酶(méi)一偶聯比色法
GOD-POD法即葡萄糖氧化酶法,可以用來測定葡(pú)萄(táo)糖(táng)。葡萄糖氧化酶(glucose oxidase,GOD)利用氧(yǎng)和水將葡萄糖氧化為葡萄糖酸,並(bìng)釋(shì)放過氧化氫。過氧化物酶(peroxidase,POD)在色(sè)原性氧受體存在時將過氧化氫(qīng)分解為水和氧,並使色原性氧受體 4-氨基安替比林和酚去氫縮合為紅色醌類化(huà)合物,即Trinder反(fǎn)應。紅色醌類化(huà)合(hé)物的(de)生成量與葡萄糖含量成正比。這一方法目前在臨(lín)床上用於診斷糖尿病。由於可自動化操作,因此未來也可能應用於發酵液的檢測。
HPLC法
莫(mò)海濤等建立了同時(shí)測定葡萄糖、蔗糖、麥芽糖和(hé)乳糖的高效液相色譜方法。樣品經水超聲波浸取,采用Hypersil NH2柱分離,流動相為乙晴/水(二者體積比為80:20),用激光蒸發光散射檢測器檢測。結果表明:四者的線性(xìng)範圍分別為15~1 000,20 --1500,15~1000,12~1 000mg/L,檢出限為4.5~6.0 mg/L,樣品的加(jiā)標平均回收率(lǜ)為92.9%~99.0%,相對(duì)標準偏差為1.9%~3.5%。與前者相比(bǐ),HPLC檢測的準確度和專一性更高。
旋光度法(fǎ)
在葡萄糖濃度與旋光(guāng)度值的線性關係的考察中(zhōng),精密稱(chēng)取(qǔ)適量經98~100℃幹燥至恒重的純葡萄糖(táng),加水溶解並稀釋(shì),按照旋光光度法測定,旋(xuán)光度a對濃度C回歸,得到的回歸方程。結果表明:當葡萄(táo)糖質量濃度為15.58~103.84 g/L時,具有良好的線性 關係。
生物(wù)傳感(gǎn)器法
葡萄糖生物傳感器(qì)的工作原理如下:葡(pú)萄糖首先在GOD催化作用下生成過氧化(huà)氫,過氧化氫在過氧化物酶(HRP)的催化作用下,將2價還原態電介質(zhì)Os氧化成Os3+,氧化態電介質Os3+在較低工作電壓下被還原,產生的還原電(diàn)流與被測葡萄糖濃度呈線性(xìng)關 係,通過檢測還(hái)原電(diàn)流即可(kě)得到對應葡萄糖濃度。
氣(qì)相色譜(pǔ)法
采用(yòng)氣相色譜分析萄萄(táo)糖等多羥基化合物時,由於多羥基化合物極性大(dà)、沸點高,直接進樣分析無法進行(háng),所以多采用矽醚化試劑(jì)與羥基反(fǎn)應,生成易揮發、低極性、高穩定性的三甲基矽醚衍生物,再進行氣相(xiàng)色譜分析。

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